王仲孚教授团队多年来围绕基于生物质谱技术的高灵敏度分析和鉴定寡糖（链）的新方法和新技术的建立及应用开展了一系列工作。前期率先实现了O-糖链释放及吡唑啉酮类衍生化试剂（PMP）同时标记（Proteomics 2011, 11, 4229; J Chromatogr A 2013, 1274, 107），该方法既解决了糖链在碱性环境中的peeling降解，又为后续O-糖链质谱检测和分离分析提供了便利，因此该类方法在O-糖组结构分析中具有极为重要的应用（J Agric Food Chem 2016, 64, 7367; J Agric Food Chem 2019, 67, 10702; J Agric Food Chem 2020, 68, 2174; Food Chemistry 2021, 339, 127866; Carbohyd Polym 2023, 301, 120312）。后续又发展了糖蛋白N/O-糖链非还原性释放及标记PMP通用新方法，相比传统方法，新方法对所有类型N/O-糖链均适用，且可规模化应用于鸡蛋、大豆、乳类等食源材料中寡糖（链）结构的分析鉴定（Analyst 2013, 138, 5344; J Agric Food Chem 2014, 62, 7245; Anal Biochem 2014, 462, 1; J Agric Food Chem 2016, 64, 7367; J Proteome Res 2018, 17, 2345; Glycoconj J 2020, 37, 165）。

基于以上研究基础，本团队设计合成了一种结构稳定、化学选择性强的吡唑啉酮类异二官能团试剂ANPMP，并发展了糖蛋白N/O-寡糖链释放并同步标记ANPMP、分离制备、结构解析及功能分析一体化平台。成功构建了中等规模结构明确的含有83种天然寡糖单体的结构库和物质库，包括25种猪胃黏蛋白O-寡糖链单体，6种大豆蛋白N-寡糖链单体，40种人乳游离寡糖单体及12种其他来源的寡糖单体。在此基础上构建了一种含有83种天然寡糖分子的寡糖芯片，成功验证了83种天然寡糖与十种不同凝集素之间的特异性识别。随后，首次利用建立的一体化平台，初步研究了寡糖与疾病血清的IgM和IgG结合特性，为疾病的早期筛查提供了新思路。

研究策略图

该研究以‘‘Integrated analysis of natural glycans using a versatile pyrazolone-type heterobifunctional tag ANPMP’’为题在《Carbohydrate Polymers》上发表。本研究得到了国家自然科学基金（No. 31972024和31870798）和陕西省创新能力支持计划科技创新团队（2020TD-044）的项目支持。论文第一作者为讲师刘玉霞，通讯作者为王仲孚教授和黄琳娟教授。同时，本研究工作得到了美国埃默里大学医学院生物化学系宋学政教授团队和西安交通大学第二附属医院樊江波教授的大力支持和帮助。

论文信息：

Integrated analysis of natural glycans using a versatile pyrazolone-type heterobifunctional tag ANPMP

Yuxia Liu,^a Tong Yang,^a Jinqiao Rong,^a Jinhang Yuan,^a Lijuan Man,^a Ming Wei,^a Jiangbo Fan,^c Yao Lan,^a Yinchuan Liu,^a Guiping Gong,^a Yu Lu,^a Xuezheng Song,^b Zhongfu Wang,^a‡ and Linjuan Huang^a‡ Carbohydrate Polymers, 2024, 327, 121617.

文章链接如下：

https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2023.121617